九九九免费视频-九九九热视频-九九九热在线精品免费全部-九九九在线视频-在线观看精品国内福利视频-在线观看精品视频网站www

寶予德科學儀器

科技創造未來

服務熱線:4008-216-837

技術文章

ARTICLE

當前位置:首頁技術文章干貨丨PCR功能簡介

干貨丨PCR功能簡介

更新時間:2019-02-28點擊次數:5867
年初,中國科幻電影“小破球流浪地球”持續熱映,片中洗腦循環的經典臺詞讓觀眾會心一笑,小寶覺得這句話用在科研界一樣適用:新手除了了解基本的實驗操作原理及步驟之外,還應對實驗儀器有大致的認知,能夠讓儀器輔助實驗順利進行。

在初次接觸PCR儀時,小白們都會有各種各樣的困惑。譬如:PCR儀上的熱蓋和PCR管蓋作用一樣嗎?,不同品牌的熱蓋都是一樣的嗎?熱啟動又是什么意義?兩個加熱模式哪種情景適用?帶著這些問題,小寶給大家一一解答!

0
1

*,PCR儀又稱熱循環儀,是配合PCR過程的變溫儀器,熱蓋是儀器上方的一部分,用來免樣品在高溫環境下蒸發冷凝在管蓋上而減少反應樣品體積的風險。

0
2

PCR又稱聚合酶鏈反應,是體外擴增目的DNA片段的方法,在多方面廣泛應用,主要分為三大步驟:高溫變性、低溫退火、適溫延伸。分別添加引物、模板、Taq酶、dNTP和緩沖液等反應物混合,在約為95℃環境下,雙鏈DNA氫鍵斷裂解旋為單鏈;單鏈與人工設計的引物在約為60℃溫度下,按照堿基互補配對的原則相結合;并升溫到72℃左右,利用Taq酶延伸合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。

0
3

在此過程中,某段溫度會接近或高于100℃,部分樣品會隨著高溫向上蒸發,遇上溫度較低的PCR管蓋,則會冷凝在管蓋上,管內的樣品就會有一定損失,少一部分沒有參加循環,造成樣品得率降低。

在此之前儀器還不具備這個裝置,是通過樣品里滴加石蠟油來解決此問題的,但實際上后續對石蠟油的處理較為繁瑣。后續熱蓋的出現能夠有效避免該風險,熱蓋的溫度一般都會比模塊高5-10℃,這樣模塊內的PCR管上端溫度始終大于反應液的溫度,由于高溫處壓強大于低溫處壓強,液體不會向上蒸發,于是所有的樣品反應液體積不會發生變化。

0
4

但由于樣品管的高度不一,早期的儀器不可調熱蓋只能用于統一高度的樣品管,當使用較矮的樣品管時,需要加入鋁塊,較為麻煩;目前可調式熱蓋分為旋鈕式自調節式等:有些儀器旋鈕式熱蓋的高度和壓力是根據樣品管可調整:但換樣之前需要將旋鈕旋回原位。并且存在壓力不好控制的問題:過緊會使樣品管變性等;過松則無法達到相應溫度影響結果。自調節則可根據樣品管高低調節高度。



所謂熱啟動則是在樣品管中添加的Taq酶用于適溫延伸這一步驟,但往往在室溫的環境下,Taq酶也能發揮作用,因此在加反應物或是高溫變性前,都需要防止Taq酶在非適當溫度下開始工作,以避免該情況下非特異性產物。模板和酶數量一定,產生非特異性的產物,這說明特異性產物含量會降低,因此,會在冰上加樣,或是先預熱PCR儀,再迅速放入PCR管。



還可以將凝固冷卻的蠟將引物,Mg2+,dNTP,和緩沖液混合和剩余反應組分上、下層隔離開來。在變性階段,蠟受熱熔化,所有成分混合,且液態蠟浮到樣品的上部,充當熱蓋的作用,但后續蠟處理較為棘手。利用化學修飾或者制備抗原抗體復合物等方法使得其按照溫度高低控制酶活性。


石蠟熔化示意圖(管內黃色部分為石蠟)

 

 

面對高通量的樣品,手動熱啟動防護會十分耗時,因此,PCR儀會設定熱蓋溫度,當熱蓋加熱到一定溫度之前,模塊溫度保持不變;熱蓋溫度達到設定值時,模塊迅速升溫,達到熱啟動的效果。

 

另外,很多PCR儀在加熱模式上有Tube、Block兩種方式可選。這是因為儀器的溫度傳感器在模塊下部,實際上無法測得樣品管內的溫度。一般情況(Block)下,在輸入設定溫度及運行時間時,指的是模塊在到達溫度下持續相應的時間,樣品管的溫度不能迅速達到的溫度;而Tube模式是先將模塊溫度高于設定溫度,等樣品管溫度到達溫度,再將模塊溫度降到溫度,這樣能快速使管內溫度達到設定值。不同反應體積和要求可使用不同的模式:普通PCR或體積較大使用Tube模式,當長時間保溫且對溫度過沖要求較高或是體積較小時,可以使用Block模式。

 

爆款

人氣產品

HOT SALE

FastAmp基因擴增儀

PCR中的變型金剛

點擊了解

了解更多詳情,敬請關注及咨詢寶予德公眾號!

返回列表
  • 服務熱線 13711185719
  • 電子郵箱

    huilian.gao@bio-dl.com

掃碼加微信

Copyright © 2025 上海寶予德科學儀器有限公司版權所有    備案號:滬ICP備16027857號-3

技術支持:化工儀器網    sitemap.xml

丝袜AV在线丝袜AV天堂| 欧美熟老妇人多毛OOXⅩ| FREEZEFRAME丰满人妻| 久久AV喷吹AV高潮AV欧美| 在线观看成人网站| 人人添人人妻人人爽频| 国产精品免费无遮挡无码永久视频 | 好男人 好资源在线 视频| 亚洲中文字幕无码中文字| 欧美精品免费观看二区| 国产★蜜臀AV无码| 亚洲精品无码AV中文字幕| 精品一区二区三区在线视频| 亚洲色欲色欲大片WWW无码| 女儿的朋友中字头| 囯产精品一品二区三区| 亚洲国产精品无码久久青草| 免费中文无码AV动作片| 放荡的熟妇高清视频| 亚洲国产成人无码影片在线播放| 免费无码国产V片在线观看| 第一次爱的人视频播放完整版| 亚洲AV永久无无码精品一区二区| 没带罩子让他吃了一天药会怎样| 成熟丰满熟妇AV无码| 无码人妻毛片丰滿熟婦区毛片色欲 | 公愆憩止痒玉米地使用方法| 亚洲丁香婷婷久久一区二区| 内射大B美女毛片| 国产AV无码区亚洲AV欧美| 亚洲人成色7777在线观看| 欧美伊人色综合久久天天| 成熟人妻视频一区区三区| 亚洲а∨天堂男人色无码蜜臀69| 女性の乳頭を遮住する方法| 国产成人亚洲精品无码H| 夜里18款禁用B站入APP软件| 日本熟妇色XXXXX日本老妇| 韩国无码AV片在线观看网站| 99久久精品费精品国产一区二区| 日韩人妻无码中文字幕视频| 激情综合婷婷丁香五月情| AV亚欧洲日产国码无码| 性色ΑV一二三天美传媒| 免费看美女脱精光的网站| 国产AⅤ无码专区亚洲AV综合网 | 国产乱人伦AV在线A麻豆| 中国CHINESE壮男GⅤ军警| 睡美人免费观看完整版西瓜| 久久天天躁狠狠躁夜夜AⅤ| 从厨房一路顶撞到卧室门好吗| 亚洲欧美一区二区成人片牛牛| 亲情会王芳高敏大团圆| 交换朋友夫妻客厅互换4韩国| 在线无码免费网站永久| 脱色摇床THERMO网站| 美国ZOOM人与ZOOM| 国产乱人伦APP精品久久| 18禁美女裸体爆乳无遮挡动图| 日本三级强伦姧护士HD| 久本草在线中文字幕| 抽搐一进一出再深一点| 一本大道大臿蕉无码视频| 熟妇与小伙子MATUR老熟妇E| 噜噜狠狠色综合久色A站网址| 草草最新发地布地址①·| 亚洲人成无码网站| 熟女一区二区三区| 麻豆视传媒官网免费观看| 国产毛片精选好视频| AV中文字幕潮喷人妻系列| 亚洲国产精品久久久久4婷婷 | 中文在线っと好きだった最新版| 日韩精品一区二区三区中文无码| 久久久精品国产免大香伊| 成年免费A级毛片免费看| 亚洲中文字幕久久无码| 太大太长太粗太久太硬了| 蜜臀AV 国内精品久久久| 国产亚洲美女精品久久久| 被多个男人调教奶头玩奶头| 亚洲国产成人爱AV在线播放| 日韩一卡2卡3卡4卡新区亚洲| 浪荡女天天不停挨CAO日常视频| 国产精品一亚洲AV日韩AV欧| www.97少妇视频| 亚洲色大情网站WWW| 乌克兰性猛交ⅩXXX乱大交| 欧美肉体XXXX极品粗大| 久久97超碰人人澡人人爱| 国产传媒精品1区2区3区| 中国人熟女HDFREEHDXⅩ| 亚洲AV成人无码久久精品| 日韩精品无码一本二本三本| 精品无人区无码乱码大片国产 | 97久久香蕉国产线看观看| 亚洲AV无码久久久久网站蜜桃 | 51精产国品一二三产区区| 亚洲乱亚洲乱妇无码| 无码丰满人妻熟妇区| 人妻熟妇久久久久久精品无码专区| 久久久久久久精品免费| 国产免费不卡午夜福利在线| 成交人性成交视频| 中文字幕一区日韩精品| 亚洲精品欧美二区三区中文字幕| 四川老妇女乱HD| 秋霞AV鲁丝片一区二区| 久久综合国产乱子伦精品免费| 国产午夜精华无码网站| 丰满人妻一区二区三区视频53| AV无码人妻一区二区三区牛牛| 野花日本大全免费观看2019 | 上到少妇叫爽TUBE| 欧美最猛性XXX| 麻豆人妻少妇精品无码专区| 精品国产乱码久久久久软件| 国产精品毛片无码| 东京热人妻丝袜AV无码| CSGO内射最强对手| 中文字幕免费不卡二区| 亚洲人成网线在线播放VA| 亚欧乱色熟女一区二区| 特级毛片A级毛片免费播放| 人妻洗澡被强公日日澡| 女儿的朋友6中汉字| 巨爆乳中文字幕爆乳区| 久久99精品久久久久久久清纯| 国产乱人伦无无码视频试看| 公共厕所POOPING| 成年网站未满十八禁在线观看| CAOPOREN免费精品视频| 中文字幕大香视频蕉免费| 亚洲色欲久久久综合网东京热| 亚洲AV无码成人网站WWW| 无码A级毛片视频| 熟女俱乐部 五十路 六十路| 日产亚洲一区二区三区| 欧洲一卡2卡三卡4卡 乱码| 男男av在线播放| 美女露 0裸体无挡视频| 久久久国产精品VA麻豆| 九九九精品成人免费视频7| 好爽…又高潮了粉色视频| 国产无套码AⅤ在线观看| 国产激情久久久久影院小草| 国产97在线 | 中文| 堕落女教师动漫全无修| 吃奶呻吟打开双腿做受视频| 边喂奶边中出的人妻| А√中文在线资源库| JAPANESETUBE日本护士高潮| 99视频国产精品免费观看| 专干熟肥老妇人视频在线看| 中国大陆女RAPPER欢迎你| 影音先锋女人AV鲁色资源网久久| 亚洲综合网国产精品一区| 亚洲一区二区三区在线网址| 亚洲视频无码高清在线| 亚洲欧美性爱视频在线| 亚洲人成线无码7777| 亚洲人成亚洲人成在线观看| 亚洲人成色777777精品百度| 亚洲人成色77777在线观看| 亚洲人午夜射精精品日韩| 亚洲日韩在线A视频在线观看| 亚洲人成色A777777在线观| 亚洲人成网站18禁止大APP| 亚洲人成人无码www在线观看| 亚洲日韩精品无码一区二区三区 | 无码人妻精品一区二区三区蜜桃91| 天黑黑影院在线观看免费中文| 四虎国产精品永久在线| 天天夜碰日日摸日日澡性色AV| 无码H肉3D动漫在线观看| 无码专区3D动漫精品免费| 亚洲 春色 另类 小说| 亚洲AV无码成人精品区日韩 | 睡着了强行挺进岳身体| 窝窝人体色WWW聚色窝| 无码精品一区二区三区视频色欲网 | 成 人 黄 色 网 站 在线播| 成熟丰满女人丰满妇女aⅴ| 公的粗大挺进了我的密道视频 | 青青爽无码视频在线观看| 日本丰满人妻HD浓毛| 色AV永久无码影院AV| 人人爽人人操人人精品| 日韩Av一区二区三区| 色舞月亚洲综合一区二区| 我和公发生了性关系视频| 亚洲 欧美 中文 日韩AⅤ手机| 亚洲成A∨人片在线观看不卡| 亚洲欧美一区二区成人片| 一二三四影视在线观看免费视频| 自拍日韩亚洲一区在线| 99久9在线 | 免费| 成人免费无遮挡在线播放| 国产成人综合色在线观看网站| 国产小视频A在线观看|